Kasteel Karlstein ) is een 14e-eeuws gotisch kasteel in Karlštejn in Tsjechië, zo'n 20 km westelijk van Praag.
Het kasteel werd gebouwd in 1348 in opdracht van Karel IV, koning van Bohemen en keizer van het Heilige Roomse Rijk. Het was bedoeld als bewaarplaats voor de kroonjuwelen, heilige relikwieën en de rijksschatkist.